【ISCO】丙酮作为乙酸乙酯的替代品在Flash色谱中的应用

一、摘要

乙酸乙酯是Flash色谱法中蕞常用的溶剂之一。它易于获得，并且可以通过旋转蒸发轻松去除。然而，乙酸乙酯在200至235纳米的波长范围内有吸收作用，这一区波段也是许多化合物吸收紫外光的区域。对于这些化合物，丙酮可作为乙酸乙酯的替代品。丙酮比乙酸乙酯稍微更具有极性，使得某些化合物的洗脱速度更快。

二、使用丙酮的原因

适用于分离吸收短波长的化合物

使用丙酮作为Flash溶剂的主要原因是它不吸收短波长。如图1所示，丙酮在220纳米以下的波长范围内没有吸收，而乙酸乙酯在这一范围内有吸收。这使得丙酮适用于吸收在220纳米或更少的化合物的梯度Flash色谱法。

图1：丙酮和乙酸乙酯的紫外光谱

乙酸乙酯具有“末端吸收"特性

常用的乙酸乙酯具有“末端吸收"（即在接近200纳米的波长处，这通常是紫外检测器的范围末端），因此使用这种溶剂时，很难检测到具有相似吸收特性(低波长波段)的化合物。

合成和纯化3-(2-硝基苯胺)丙月青为使用丙酮进行纯化提供了一个示例。后文范例为以丙酮醇化3-(2-硝基苯胺)丙月青及其反应副产物。

在一个圆底烧瓶中，加入对硝基苯胺（25.084克），溶解在无水乙醇（125毫升）中。反应混合物加热至80°C，然后加入Triton B（3.8毫升）。在搅拌的反应混合物中加入丙烯腈（35毫升），并在80°C下搅拌24小时。混合物在旋转蒸发器上蒸发，得到一种棕色油状物。

将油状物溶解在40毫升的乙酸乙酯中。向溶液中加入活性炭（1.6克），然后进行过滤。加入庚烷（50毫升），加热至沸腾后让其冷却。两天后，收集到深棕色晶体，得到6.3克纯产品，即3-(2-硝基苯胺基)丙月青。

一个由对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青按50:50比例组成的30毫克样品，使用表1中的参数进行了分离。

或者，可以通过简单地将反应混合物吸附到硅胶上并在RediSep柱上运行混合物(可以固体上样后以RediSep正向柱纯化)来取代结晶法纯化步骤。一个330克的柱子可以轻易地容纳1/6的反应混合物。即使需要进行六次运行，也可以节省一天的时间，并且产率会更高，因为3-(2-硝基苯胺基)丙月青仍然留在结晶后的上清液中。

图2：在210纳米处检测对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青的梯度洗脱

图3：在210纳米处检测对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青的梯度洗脱，以及更高的样品加载量

由于丙酮比乙酸乙酯更具极性，使用丙酮会使化合物更快地洗脱，从而缩短运行时间并节省溶剂。丙酮的成本几乎是乙酸乙酯的一半，这可以带来显著的经济节约。

天然产物

己烷/丙酮通常用于纯化天然产物。它可以以高浓度（高达100%）使用，而甲醇通常被认为会溶解硅胶。丙酮也是一种有用的中极性溶剂。

CombiFlash允许用户在一次运行中轻松从己烷/丙酮梯度洗脱切换到甲醇，从而洗脱出极性范围广泛的化合物。CombiFlash系统最多有四个溶剂入口，便于溶剂切换。

三、注意事项

丙酮确实存在一些不足之处。首先，丙酮容易从空气中吸收水分，因此不使用时应将瓶盖密封好。在冲提TLC板时，应使用新鲜的丙酮。其次，丙酮会吸收波长超过220纳米的紫外光，因此对于仅在254纳米下工作的检测器，丙酮并不适用。

四、结论

对于在220纳米以下波长处有吸收且不吸收254纳米紫外光的化合物，可以使用丙酮代替乙酸乙酯。丙酮是乙酸乙酯的一种更经济的替代品。